• 1. 徐州矿务集团总医院普通外科(江苏徐州 221006);
  • 2. 徐州矿务集团总医院感染性疾病科(江苏徐州 221006);
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目的观察不同浓度曲妥珠单抗单独或联合奥沙利铂对 SW-620 人结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并探讨其作用机制。 方法 体外培养 SW-620 人结肠癌细胞。① 细胞增殖实验:将细胞分为 2 个大组:曲妥珠单抗组和曲妥珠单抗+奥沙利铂组,每个大组内设 8 个浓度小组(每个小组设 5 个复孔),曲妥珠单抗组的浓度依次为 0、0.001、0.01、0.1、1、10、100 及 1 000 μg/mL,对应的曲妥珠单抗+奥沙利铂组曲妥珠单抗的浓度与前相同,不同之处在于均加入了奥沙利铂(10 μmol/L)。采用 CCK-8 法检测各组细胞的吸光度(A)值。② 细胞凋亡实验:组别设置同增殖实验,只是曲妥珠单抗的浓度仅包括 0、0.1、1 及 10 μg/mL。采用流式细胞仪检测各组细胞的细胞凋亡率及细胞周期分布。③ 人表皮生长因子受体 2(her-2)蛋白表达检测:分别以 0、100 及 1 000 μg/mL 曲妥珠单抗,以及 0、1 及 10 μg/mL 曲妥珠单抗联合奥沙利铂(10 μmol/L)处理 SW-620 细胞,采用 Western blot 法检测各组细胞中 her-2 蛋白的表达。 结果① 细胞增殖实验:同种浓度下曲妥珠单抗+奥沙利铂组的 A 值均低于曲妥珠单抗组(P<0.05),且随着曲妥珠单抗浓度的增加,A 值在逐渐降低。② 细胞凋亡实验:同种曲妥珠单抗浓度下,曲妥珠单抗组+奥沙利铂组的细胞凋亡率均较曲妥珠单抗组高(P<0.05)。流式细胞检测:不同浓度曲妥珠单抗+奥沙利铂处理后,随浓度增加,G1 期细胞比例呈下降趋势,S 期细胞比例呈上升趋势,且呈剂量依赖性;至 1 μg/mL 和 10 μg/mL 时,与曲妥珠单抗组比较,曲妥珠单抗+奥沙利铂组的 G1 期细胞比例较低,S 期细胞比例较高(P<0.05);在 0.1、1 和 10 μg/mL 浓度的曲妥珠单抗条件下,曲妥珠单抗联合奥沙利铂组的 G2 期细胞比例较曲妥珠单抗组升高(P<0.01)。③ her-2 蛋白的表达水平:1、100 及 1 000 μg/mL 曲妥珠单抗组细胞中 her-2 蛋白的表达水平逐渐降低,3 组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);0、1 及 10 μg/mL 曲妥珠单抗+奥沙利铂组中 her-2 蛋白的表达水平也逐渐降低,3 组间两两比较差异也有统计学意义(P<0.05)。 结论高浓度曲妥珠单抗可抑制 SW-620 人结肠癌细胞的增殖,诱导其凋亡。曲妥珠单抗和奥沙利铂具有协同抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。

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