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找到 关键词 包含"细胞增殖" 61条结果
  • 胆囊结石患者胆汁对人胆囊癌细胞增殖的影响

    目的 观察胆囊结石患者胆汁(CB)对人胆囊癌细胞系GBC-SD生长的影响,探讨胆囊结石与胆囊癌发生与发展的关系。 方法 应用四唑蓝(MTT)比色法检测20例CB和20例正常胆汁(NB)对GBC-SD细胞增殖的影响,应用流式细胞仪测定细胞周期和凋亡。 结果 CB与NB比较,前者可明显促进GBC-SD细胞增殖,用CB处理48 h后GBC-SD细胞增殖指数显著上升(P<0.05)。CB组S期细胞比例为(49.26±8.07)%,明显高于NB组的(25.54±6.57)%,P<0.05; CB组G0/G1期细胞比例为(40.59±9.12)%,明显低于NB组的(60.64±13.42)%,P<0.05。CB组和NB组细胞凋亡率分别为(5.50±1.16)%和(3.91±1.76)%,Pgt;0.05。 结论 CB具有潜在的促增殖活性,且胆囊结石与胆囊癌的发生与发展关系密切。

    发表时间:2016-08-28 04:43 导出 下载 收藏 扫码
  • XGD1对人外周血T淋巴细胞增殖和IL2R表达的影响

    目的探讨XGD1的免疫抑制作用及其作用机理。方法不同浓度的XGD1作用于植物血凝素(PHA)和刀豆素A(ConA)诱导的正常人外周血T淋巴细胞,共同培养48 h和72 h,用改良MTT法观察XGD1对人T淋巴细胞增殖的影响,用流式细胞术检测XGD1对T淋巴细胞表面IL2R表达的影响; 同时观察联合应用CsA和XGD1对细胞增殖及IL2R表达的影响。结果XGD1对PHA和 ConA诱导的正常人外周血T淋巴细胞增殖有明显的抑制作用,其作用与药物浓度有关, 在一定剂量范围内,抑制作用随XGD1剂量的递增而加强; XGD1对PHA和 ConA激活的T淋巴细胞表面IL2R的表达有显著抑制作用,阳性率从正常对照活化细胞的47.67%降为25.03%; 联合应用CsA,上述抑制作用增强。结论XGD1具有免疫抑制作用,能降低IL2R表达,可能是其免疫抑制作用的重要机理之一。

    发表时间:2016-08-28 04:49 导出 下载 收藏 扫码
  • 神经递质对肝细胞增殖的影响△

    目的探讨自主神经控制对人肝细胞增殖的影响及其机理,并对增殖相关受体定位。方法用去甲肾上腺素(NE)及其拮抗剂及激动剂和乙酰胆碱(Ach)及其阻滞剂作用于人传代正常肝L02细胞及肝癌Bel7402细胞,分别于4 h、24 h、48 h及72 h用改良MTT法检测上述药物对细胞增殖的影响; 免疫组织化学染色法对肝L02细胞的肾上腺素受体(α1BAR及β2AR)和表皮生长因子受体(EGFR)定位。结果NE对人正常肝细胞及肝癌细胞具有促增殖作用,且随浓度增加其促增殖作用也增加,4 h的增殖率较其它时间点显著增高(P<0.05); NE+心得安组的作用与NE组间差异无显著性意义; 二羟苯基异丙氨基乙醇的作用不明显; Ach对人正常肝细胞的增殖具有抑制作用,且随浓度增加其抑制作用也增加,加用阿托品在24 h及48 h与Ach比抑制率显著降低(P<0.05); 琥珀胆碱组在24 h、48 h及72 h对细胞的增殖也具有抑制作用(P<0.05,P<0.01)。所有人肝L02细胞都呈α1BAR、β2AR及EGFR免疫反应阳性,主要定位于胞膜及胞浆。结论血清存在下,交感神经递质NE早期对人正常肝细胞L02及人肝癌细胞Bel7402具有促增殖作用,其作用是通过激动αAR实现的, βAR对人肝细胞增殖无影响。副交感神经递质Ach对人正常肝细胞L02的增殖具有抑制作用,其作用是通过激动M及N型胆碱受体实现的。

    发表时间:2016-08-28 05:11 导出 下载 收藏 扫码
  • 脂联素对气道平滑肌细胞增殖作用及一磷酸腺苷活化蛋白激酶活性的影响

    目的 探讨脂联素对气道平滑肌细胞( AMSCs) 增殖的影响及相关机制的研究。方法 体外培养大鼠气道平滑肌细胞株; RT-PCR 法检测ASMCs 脂联素受体的表达; 不同浓度的脂联素( 5、10、20、40 及80 μg/mL) 作用于体外培养的大鼠ASMCs, 孵育不同时间, MTT 法检测吸光值, 计算细胞抑制率; 不同浓度脂联素( 5、10、20 及40 μg/mL) 作用于气道平滑肌细胞48 h 后提取蛋白,Western blot 法检测一磷酸腺苷活化蛋白激酶( AMPK) 及磷酸化一磷酸腺苷活化蛋白激酶( pho-AMPK) 的表达。结果 5 ~80 μg/mL 脂联素在不同时间( 1、12、24、48 及72 h) 明显抑制ASMCs 增殖, 并存在浓度依赖性( r =0. 324, Plt;0. 01) 和时间依赖性( r =0. 607, P lt;0. 01) ; Western blot 法检测显示空白对照组无pho-AMPK表达, 干预组随着脂联素浓度的升高AMPK 的活性增强( r =0. 907, P lt;0. 01) , pho-AMPK/AMPK 比值分别为( 27. 66 ±1. 03) %、( 31.91 ±0. 86) % 、( 75. 52 ±2. 67) % 和( 84. 50 ±1. 05) %, 差异有统计学意义( P lt;0. 05) 。结论 脂联素可能通过激活AMPK来抑制体外培养的ASMC 增殖。

    发表时间:2016-08-30 11:53 导出 下载 收藏 扫码
  • Nesprin蛋白对骨髓间充质干细胞的影响

    目的 构建nesprin蛋白siRNA慢病毒载体(LV-siNesprin),感染骨髓间充质干细胞(MSCs),观察nesprin蛋白对MSCs的影响。 方法 针对nesprin靶基因序列设计并合成4对miRNA oligo,并将4对oligo退火成双链DNA,测序鉴定。将4种miRNA干扰质粒(SR-1、SR-2、SR-3、SR-4)转入大鼠血管平滑肌细胞,用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白印迹法(Western blotting)检测干扰效应,筛选最佳干扰序列;将最佳干扰序列和pDONR221载体进行重组反应,获得含干扰序列的入门载体,再将入门载体和慢病毒表达的目的载体pLenti6/V5-DEST进行重组反应获得含干扰序列的LV-siNesprin+绿色荧光蛋白(GFP),包装慢病毒,测定病毒滴度。LV-siNesprin+GFP转染MSCs,Western blotting鉴定比较nesprin蛋白表达情况(分为LV-siNesprin+GFP组、GFP对照组和正常细胞组),用4,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色观察细胞核形态改变和四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测MSCs感染LV-siNesprin后24 h、48 h、72 h和96 h的增殖情况(分为LV-siNesprin+GFP组、GFP对照组和正常细胞组)。 结果 测序证实合成的4对miRNA oligo正确,RT-PCR和Western blotting筛选出最佳干扰miRNA质粒SR-3,成功构建LV-siNesprin,包装慢病毒,病毒悬液的活性滴度为1×106 ifu/ml。LV-siNesprin转染MSCs后,nesprin蛋白表达明显下降,出现细胞核融合、核碎裂等形态学改变;MTT法检测显示,LV-siNesprin+GFP组MSCs增殖速度较GFP对照组和正常细胞组减慢。 结论 Nesprin蛋白对MSCs核膜稳定维持核膜空间结构起作用,并利于细胞增殖更新。

    发表时间:2016-08-30 05:50 导出 下载 收藏 扫码
  • 羧甲基壳聚糖对体外培养雪旺细胞增殖周期及其分泌神经营养因子的影响

    目的探讨羧甲基壳聚糖(carboxymethylated chitosan,CMCS)对雪旺细胞(Schwann cells,SCs)增殖周期及分泌神经营养因子的影响及其作用机制。 方法取3~5日龄SPF级SD大鼠20只,雌雄不限,体重25~30 g,取双侧坐骨神经体外培养SCs,经S-100免疫荧光标记鉴定。取处于对数生长期的第2代SCs,细胞计数检测试剂盒8检测不同浓度CMCS及作用不同时间对SCs增殖的影响。将SCs分为4组,加入CMCS调整终浓度为50(B组)、100(C组)、200 μg/mL(D组),对照组(A组)加入等量PBS,流式细胞技术检测处于S期细胞的百分比(S%)和增殖指数(proliferation index,PI)分析细胞周期;实时定量PCR与Western blot检测SCs合成NGF和睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor,CNTF)的含量。 结果S-100免疫荧光标记鉴定示细胞阳性率达90%以上。CMCS在10~1 000 μg/ mL浓度范围内对SCs增殖均有促进作用,200、500 μg/mL组促增殖效应最明显(P lt; 0.01),200 μg/mL与500 μg/mL组间比较差异无统计学意义(P gt; 0.05)。采用200 μg/mL CMCS培养SCs不同时间,发现作用24 h时其促增殖效果最明显,与对照组(200 μg/mL CMCS作用0 h)比较差异有统计学意义(P lt; 0.01)。B、C、D组S%及PI均显著高于A组,差异有统计学意义(P lt; 0.05);C、D组显著高于B组(P lt; 0.05),C、D组间差异无统计学意义(P gt; 0.05)。实时定量PCR和Western blot检测均显示,B、C、D组NGF与CNTF mRNA和蛋白表达均显著高于A组(P lt; 0.05);其中D组作用最明显。 结论CMCS可以促进SCs增殖及细胞周期进程以及分泌神经营养因子。

    发表时间:2016-08-31 04:08 导出 下载 收藏 扫码
  • 严重烧伤患者血清对人脐带MSCs生物学特性的影响

    目的 通过观察严重烧伤患者血清对体外培养的人脐带MSCs(human umbilical cord MSCs,hUCMSCs)生物学行为的影响,探讨hUCMSCs移植治疗严重烧伤的可行性。 方法 取足月剖腹产手术的健康胎儿脐带组织分离培养hUCMSCs,将第3代hUCMSCs用于实验。根据培养血清不同将实验分为3组,分别为10%FBS组(A组)、10%正常血清组(B组)和10%烧伤血清组(C组)。于培养24 h、72 h和6 d,采用倒置显微镜观察各组细胞形态及融合情况,MTT法测定细胞增殖;培养后第6天采用碘化丙啶染色、流式细胞仪检测细胞周期,吖啶橙/溴化乙锭染色法检测细胞凋亡,β-半乳糖苷酶(β-galactosidase,β-gal)染色检测细胞衰老,ELISA法测定B、C组血清中TNF-α、IL-1、PDGF及IGF-1含量。 结果 各时间点各组细胞形态均呈长梭形,部分呈多角形;但C组细胞融合速度显著快于A、B组。细胞增殖曲线显示,培养2~6 d,C组增殖细胞数高于A、B组,差异有统计学意义(P lt; 0.05)。流式细胞仪检测示,培养6 d A、B、C组hUCMSCs增殖期(S期)比例分别为9.21% ± 1.02%、11.79% ± 1.87%和20.54% ± 2.03%,C组显著高于A、B组(P lt; 0.05)。各时间点各组细胞形态和结构正常,未见细胞核着橘红色荧光的凋亡细胞或死亡细胞。培养6 d A、B、C组β-gal染色阳性细胞百分率分别为4.8% ± 0.2%、3.8% ± 0.4%和2.6% ± 0.1%,C组显著低于A、B组(P lt; 0.05)。ELISA法检测C组血清中TNF-α、IL-1、PDGF及IGF-1含量显著高于B组,差异有统计学意义(P lt; 0.05)。 结论 严重烧伤患者血清中含有较高水平的TNF-α、IL-1、PDGF和IGF-1等细胞因子,可显著刺激hUCMSCs快速增殖,不引起细胞凋亡,能减少细胞衰老,将hUCMSCs移植治疗严重烧伤可行。

    发表时间:2016-08-31 04:07 导出 下载 收藏 扫码
  • 降钙素基因相关肽对人脐静脉血管内皮细胞增殖和迁移的影响及机制研究

    目的 组织工程骨的神经化能有效促进支架材料内血管生成,修复骨缺损。研究降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)增殖与迁移的作用,进一步揭示组织工程骨的神经化促血管生成机制。 方法 体外分离获取HUVECs,并通过血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)与CD31 抗原鉴定,取第1 代细胞用于实验。实验分为6 组,分别以0(A 组)、1 × 10—12(B 组)、1 × 10—11(C 组)、1 × 10—10(D 组)、1 × 10—9(E 组)、1 × 10—8 mol/L(F 组)浓度CGRP 干预HUVECs。采用细胞免疫荧光观察HUVECs 的CGRP1 受体(CGRP1 receptor,CGRP1R)表达情况,AlarmarBlue 法动态检测各组HUVECs 增殖率,Transwell 小室检测各组HUVECs 的迁移能力,ELISA 法检测HUVECs 分泌VEGF 的水平,Westernblot 法检测其局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)的表达。 结果 分离的细胞通过形态学及vWF、CD31 免疫荧光鉴定为HUVECs,并可见CGRP1R 在细胞质和细胞膜表达。CGRP 呈时间- 浓度依赖性刺激HUVECs 增殖;B ~ F组各时间点细胞增殖能力均高于A 组(P lt; 0.05),F 组各时间点细胞增殖能力最高。B ~ F 组迁移细胞数均显著高于A组(P lt; 0.05),最大增幅达3 倍以上。B ~ F 组VEGF 分泌量均显著高于A 组(P lt; 0.05);C、D 组促进细胞分泌VEGF 的能力最强。Western blot 检测示,与A组相比,B~F组CGRP刺激HUVECs 3、7、10 d 后,FAK表达明显增加(P lt; 0.05)。 结论 CGRP 对HUVECs 的增殖和迁移有直接促进作用,可能作用机制为CGRP 能促进VEGF 分泌和增加FAK 的表达。

    发表时间:2016-08-31 04:23 导出 下载 收藏 扫码
  • 雌激素对人表皮干细胞增殖与迁移影响的体外实验

    目的 表皮干细胞(epidermal stem cells,ESCs)在体内的微环境十分复杂,雌激素可能是主要的参与者。探讨雌激素对体外培养的hESCs 增殖与迁移的影响。 方法 取自愿捐赠的正常人包皮标本,采用密度梯度离心法分离培养hESCs,并传至第2 代。流式细胞仪检测第2 代hESCs 整合素β1、细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK19)、CK14和CK10 抗原表达以鉴定hESCs。取第2 代hESCs 2 × 106 个分别用含0.1 nmol/L 雌激素的ESCs 专用培养基(A 组)、含10 nmol/L 雌激素受体阻断剂的ESCs 专用培养基(B 组)以及普通ESCs 专用培养基(C 组)进行培养;于培养后24 h 刮擦生长融合成片的hESCs,制备宽度为100 μm 的体外单层hESCs 损伤模型。于模型制备后24、48、72 h,倒置相差显微镜下观察各组表皮创面愈合情况(即hESCs 迁移情况),并计算模型制备后72 h 各组创面愈合率;于模型制备后24、48、72、96、120 h,采用MTT 法检测hESCs 分裂增殖活性。 结果 原代培养的hESCs 贴壁呈单层卵圆形、集落样生长。流式细胞仪检测第2 代hESCs 的整合素β1、CK19、CK14 呈阳性标记,阳性率分别为96.63%、95.47%、94.27%;CK10 呈阴性标记,阳性率为1.32%。模型制备后24、48、72 h,各组均可见hESCs 迁移越过创缘,其中A 组越过创缘的细胞数多于B、C 组,C 组多于B 组;模型制备后72 h,A、B、C 组创面愈合率分别为69.00% ± 0.05%、35.00% ± 0.05%、48.00% ± 0.06%,组间比较差异均有统计学意义(P lt; 0.05)。模型制备后24、48、72、96 和120 h,A 组hESCs 分裂增殖活性高于B、C 组,C 组高于B 组,差异均有统计学意义(P lt; 0.01)。 结论 雌激素具有促进hESCs 分裂增殖和迁移的作用,并藉此可能参与皮肤诸多的生物学作用。

    发表时间:2016-08-31 05:42 导出 下载 收藏 扫码
  • 毛囊干细胞增殖与分化相关信号通路研究进展

    目的  对毛囊干细胞增殖与分化相关信号通路的研究现状与应用前景进行综述。  方法  查阅近年国内外关于毛囊干细胞增殖与分化相关信号通路的研究文献,并进行回顾及综合分析。  结果  调节毛囊干细胞增殖与分化的多条信号通路,包括 BMP /TGF-β、Wnt、Notch、外胚层发育不全基因等,在皮肤组织的发育、更新及修复过程中发挥着重要调控作用。  结论  毛囊干细胞可作为皮肤创面修复的一种重要细胞学治疗方法。

    发表时间:2016-08-31 05:47 导出 下载 收藏 扫码
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